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离子对试剂知多少?

发件人:     |     2021-08-30

什么?样品的保留时间如此之短?!

重现性差、碱性样品的峰拖尾,

都要和哈雷彗星相媲美了? !

我的分析实验又要无休止地进行下去吗?

真让人头大......

不要慌!不要慌!

天津一方来帮忙!

当样品在反相色谱柱上的保留时间很短或者根本不保留,这时要加入相应的离子对试剂,与分析物上的离子进行结合,形成疏水性大的电中性离子对,在反相固定相上的保留增大;另外,还带来改善峰形以及使分析结果的重现性更好的奇效。下面我们就来简单说一下离子对试剂的选择:

01

由于紫外可见检测器的广泛应用于HPLC分析中,所以对离子对试剂本身的紫外吸收必须很低,烷基磺酸盐和季铵盐的紫外吸收最小,因此可用于HPLC分析。但是,在LC-MS中,烷基磺酸盐这种常见的离子对试剂,为非挥发性晶体,因此会产生界面污染问题,可选择氟代烷基乙酸类、铵盐类等高挥发性离子对试剂来满足LC-MS的连续分析而不污染界面。

02

分析酸性样品时,可选择季铵盐类离子对色谱试剂;酸性化合物与季铵盐类离子对试剂结合成电中性离子对,在反相体系中被保留。分析碱性样品时,可选择烷基磺酸盐类离子对色谱试剂;碱性化合物与烷基磺酸盐离子对试剂结合成电中性离子对,在反相体系中被保留。对于同时有酸有碱的化合物,推荐开始使用低pH流动相加上烷基磺酸盐,因为低pH可抑制酸性基团的离子化,同时,烷基磺酸盐与对碱性基团结合形成的中性离子对使化合物的保留增强。

03

离子对试剂碳链的长度决定了对样品的分离。碳链越长,对行程的电中性离子对的疏水性越强,保留时间越长。

常见离子对试剂一览表

特别注意

1)离子对试剂对pH值比较敏感,配制流动相时要求调节pH的精确度较高,否则,直接影响实验的重复性和重现性。

2)分析人的血泪经验:和进口离子对试剂相比,国内的的离子对试剂分离效果不好!

3)流动相的有机溶剂一般推荐选择甲醇,因为常用的离子对试剂在甲醇中的溶解性更好。

4)在离子对色谱中,通过改变色谱柱控制分离的方法不是首选,也不会特别有效。

5)离子对试剂在色谱柱的吸附和解吸附过程很缓慢,因此使用离子对试剂时不建议使用梯度洗脱方式。

天津一方科技有限公司做为中国领先的科学服务平台,可为您提供来自多个品牌的多种离子对色谱试剂,为您的实验提供多种解决方案。天津一方人用全方位的科学服务态度欢迎您的咨询!全国服务电话:400-185-8866!

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